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非洲猪瘟快速诊断试剂盒如何使用

  • 发布日期:2021-03-30      浏览次数:60
    •   非洲猪瘟快速诊断试剂盒 【竞道厂家发布】 Rapid diagnostic kit for African swine fever 型号:JD-ZWSJ

       竞道厂家为您提供符合国家要求的非洲猪瘟试剂盒,一下为操作步骤:

        【操作步骤】

        一、样品制备

        1、 血液样品:抗凝血样品置离心管中,8000转/分钟离心2分钟,取上层血浆;非抗凝血样品置离心 管中,待凝固后,8000转/分钟离心2分钟,取上层血清,置于灭菌离心管中,编号待检。

        2、 组织样品:采集脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体等病变组织样品0.1g.组织匀浆器或研钵中充分匀浆或研磨,加入1 mL生理盐水混匀,8000转/分钟离心2分钟,取上清于灭菌离心骨中,编号待检。

        3、 口腔液:进食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉线绑纱布团吸引动物咀嚼,收集口腔液大于 500uL, 8000转/分钟离心2分钟,取上清于灭菌离心管中,编号待检。

        4、 饲料:取适量研磨后的饲料(约0.2g),放入含1 mL生理盐水或PBS(PH为7.4)缓冲液的2 mL EP 管屮,振荡混匀,8000转/分钟离心2分钟,取上清于灭菌离心管中,编号待检.

        5、 灰尘:用无菌棉签蘸取适量环境表面上的灰尘,放入含1 mL生理盐水或PBS(PH为7.4)缓冲液的2 mL EP管中,振荡混匀,8000转/分钟离心2分钟,取上清于灭菌离心管中,编号待检。

        二、DNA的提取

        1、取裂解液200uL加入无核酸酶1.5 mL离心曾屮,分别加入血浆/血清/组织液等样品液200uL. 震荡混匀10秒或颠倒混匀10次,室温放置5分钟(如果室内温度较低时.需放置25°C水浴温育),再加入200uL无水乙醇,颠倒混匀10秒;若样品浑浊则先12000转/分钟离心1分钟处理,取上清液,以避免堵塞柱子;

        2、 将液体转入套有收集管的吸附柱中, 12000rpm离心1分钟:

        3、 弃收集管液体,向吸附柱中加600uL洗液I, 12000 rpm离心1分钟;

        4、 弃收集管液体,向吸附柱中加600uL洗液II, 12000 rpm离心I分钟;

        5、 弃收集管液体,12000 rpm离心2分钟,以彻底去除残留洗液;

        6、将吸附柱转入新的无核酸酸1.5mLEP管(长臂型)中,向柱中央滴加50 uL洗脱液,静置1分钟, 12000 rpm离心1分钟,EP管中液体即为病毒DNA。

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